1．培養(yǎng)細(xì)胞：取處于指數(shù)生長期、用較大瓶皿培養(yǎng)的、80％～90％匯合單層培養(yǎng)細(xì)胞。
2．加秋水仙素：使用zui終濃度為0.02～0.8微克/毫升營養(yǎng)液，溫箱繼續(xù)培養(yǎng)6～10小時；或用低溫封閉法：把培養(yǎng)細(xì)胞置于4℃條件下6～12小時后，再于37℃溫箱繼續(xù)培養(yǎng)6～10小時處理（加秋水仙素）。
3．采集分裂細(xì)胞：可利用分裂中期細(xì)胞體變圓與底物附著不牢特點，此時手持培養(yǎng)瓶，左右反復(fù)橫向水平搖動，令培養(yǎng)液在培養(yǎng)細(xì)胞表面反復(fù)沖刷。應(yīng)用此法可使90％的中期分裂細(xì)胞從瓶壁脫落，注意勿用力過猛，以防多量非分裂細(xì)胞脫落影響觀察。
4．離心：收集培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5～10分鐘。
5．低滲處理：吸除上清液、加入預(yù)溫至37℃的0.075M KCl溶液，在溫箱中靜置20～30分鐘。
6．預(yù)固定：向懸液中加新鮮1：3醋酸、甲醇固定液1ml，用吸管吹打調(diào)勻，此措施能起到先使細(xì)胞表面輕微固定，可防止固定后細(xì)胞粘連成塊。
7．固定：離心，同4，吸除上清液，加新鮮固定劑5～10ml；加固定劑時要用一手微斜持離心管，另手用吸管吸取固定劑，把固定劑逐滴滴在離心管壁上，使之慢慢流入離心管中，然后輕輕吹打均勻，置15～20分鐘。
8．重復(fù)7，末次離心后，小心吸除大部分上清，據(jù)懸液中細(xì)胞密度大小，余下固定液0.5～1ml。
9．制片：用滴片法制片，按如下步驟：*洗凈載物片，勿留任何油脂，置冰箱中儲備備用。滴片前現(xiàn)從冰箱中取出冷載物片1片，在載物片表面出現(xiàn)細(xì)微水氣時，立即向片的一側(cè)滴2～3滴細(xì)胞懸液，滴片時的距離能保持半米高度才好。滴片后置室溫中令其自然干燥，或用吹風(fēng)機(jī)熱風(fēng)吹干亦可。如此制備好的標(biāo)本可置盒中備用或立即進(jìn)行染色觀察。
10.染色和封片：一般常用Giemsa染色：取干液Giemsa 1份加pH6.8磷酸緩沖液9份混合，染色10分鐘后，水洗、晾干、可直接觀察。如標(biāo)本需要保存或做長時間觀察，可過二甲苯兩次后，用中性樹膠封片后，再過二甲苯，然后封片亦可。
553-24-2 3-butylpyridine N-甲基野靛堿
553-21-9 539-44-6 (1R)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-1,5-methano-8H-pyrido[1,2-a][1,5]...
553-17-3 對甲基苯肼 486-87-3
553-12-8 p-tolylhydrazine α-萘乙酸鈉
553-03-7 539-47-9 (+)-alpha-isolupanine
552-94-3 3-(2-呋喃基)丙烯酸 487-06-9
552-89-6 Furylacrylic acid 5,7-二甲氧基香豆素
552-86-3 539-48-0 5,7-Dimethoxycoumarin
552846-17-0 對苯二甲胺 487-21-8
552-82-9 alpha,alpha'-diamino-P-xylene 2,4-二氧四氫喋啶
552-58-9 539-74-2 Lumazine
552-45-4 3-溴丙酸乙酯 507-28-8
552-41-0 Ethyl 3-bromopropionate 四苯基氯化砷鎓水合物
552-38-5 539-82-2 Tetraphenylarsonium chloride
552331-16-5 戊酸乙酯 507-52-8
552-32-9 Ethyl n-Valerate 2-三氟甲基-2-丙醇
552-30-7 539-86-6 1,1,1-trifluoro-2-methylpropan-2-ol
552-22-7 二烯丙基二硫 507-70-0
552-16-9 Allicin 龍腦
551-93-9 539-88-8 ((1S)-endo)-(-)-borneol
551-92-8 乙酰丙酸乙酯 508-02-1
551-62-2 Ethyl levulinate 齊墩果酸
551-16-6 539-90-2 oleanolic acid
551-15-5 丁酸異丁酯 508-75-8
551-11-1 isobutyl butyrate 鈴蘭毒甙
551-06-4 540-07-8 convallatoxin
550-99-2 己酸戊酯 509-15-9
550-74-3 amyl caproate 鉤吻堿
550-44-7 540-09-0 gelsemine free base
550378-78-4 12-二十三酮 509-34-2
550378-39-7 tricosan-12-one 溶劑紅 49
550378-07-9 540-10-3 3',6'-bis(diethylamino)spiro[isobenzofuran-1(3H),9'-[9H]xant...
550363-85-4 鯨蠟 510-15-6
550347-54-1 hexadecyl palmitate 乙酯殺螨醇
549-49-5 540-18-1 Chlorobenzilate
549-18-8 丁酸戊酯 511-08-0
548-93-6 amyl butyrate 麥角克堿
548-83-4 540-23-8 ergocristine
548-80-1 對甲苯胺,鹽酸鹽 511-45-5
548-73-2 p-Toluidine Hydrochloride 二苯哌丙醇
在線客服
