ELISA試劑盒檢測(cè)過程中的常見問題以及解決方法
ELISA試劑盒檢測(cè)過程中的常見問題還是很多的下面所提到的是我司在檢測(cè)過程中所遇到的一些ELISA產(chǎn)品會(huì)出現(xiàn)的問題及解決方法:
1. 加入反應(yīng)終止液后，沒有吸光值或吸光值偏低。
a.原因：未加入酶標(biāo)記物。
解決辦法：請(qǐng)按照操作步驟進(jìn)行。
b.原因：試劑盒內(nèi)容物未能充分回。
解決辦法：確定試劑盒內(nèi)容物回溫后再進(jìn)行操作。
c.原因：室溫太低。
解決辦法：若室溫太低(<19℃)，請(qǐng)于操作步驟4，適當(dāng)延長(zhǎng)溫育時(shí)間。
d.原因：未使用試劑盒的清洗液清洗。
解決辦法： 請(qǐng)用試劑盒內(nèi)所提供的清洗液清洗。
e.原因：試劑盒已過有效期限。
解決辦法：請(qǐng)更換成仍在有效期限內(nèi)的試劑盒。
2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性不佳，或是平行性不好。
a.原因：溫育位置避光不好或受到氣流干擾。
解決辦法： 請(qǐng)確認(rèn)溫育位置既不透光也不透風(fēng)(如抽屜內(nèi))。
b.原因：操作時(shí)間拖太久。
解決辦法：請(qǐng)?jiān)诜椒ㄊ炀毢笤龠M(jìn)行操作。
c.原因：微孔間相互污染。
解決辦法： 加樣品時(shí)，請(qǐng)小心勿濺出微孔外，以免造成其它微孔的污染。
d.原因：標(biāo)準(zhǔn)品或酶標(biāo)記物所加入的量不一致。
解決辦法：請(qǐng)使用已校正過的移液槍，并確保其與吸頭之間有高度密合性。
e.原因：添加樣品或試劑的操作方法不正確。
解決辦法：加樣品或試劑時(shí)，吸頭請(qǐng)勿接觸微孔。
f.原因：洗板過程發(fā)生問題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進(jìn)行下一步驟)。
解決辦法：請(qǐng)隨時(shí)監(jiān)控洗板機(jī)洗板過程，洗完后立即進(jìn)行下一步驟。
3. 吸光值均偏高(或線性不夠陡)。
a.原因：室溫太高(>25℃)。
解決辦法： 若無法降低室內(nèi)溫度，請(qǐng)適當(dāng)縮短步驟4的溫育時(shí)間。
b.原因：底物溶液受到污染。
解決辦法： 若發(fā)現(xiàn)底物溶液已呈現(xiàn)淡藍(lán)色，請(qǐng)不要再使用。
c.原因：反應(yīng)時(shí)間超過太久。
解決辦法：請(qǐng)控制反應(yīng)時(shí)間。
d.原因：酶標(biāo)記物污染了盒內(nèi)其它試劑。
解決辦法：使用過的吸頭應(yīng)立即丟棄，可避免試劑間相互污染，凡是試劑(特別是酶標(biāo)記物與底物溶液)接觸過的容器應(yīng)立即清洗干凈。(先以漂白水浸泡，再以清水沖洗干凈，可確保無殘留)
4. 陰性標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值低于陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值。
a.原因：微孔中的試劑未能充分混合。
解決辦法： 試劑加完后，需輕敲盤四周使其充分混合均勻。
b.原因：洗板過程發(fā)生問題。
解決辦法：請(qǐng)隨時(shí)監(jiān)控洗板機(jī)洗板過程，洗完后立即進(jìn)行下一步驟。
c.原因：添加樣品或酶標(biāo)記物的量不一致。
解決辦法： 請(qǐng)使用已校正過的移液槍，并確保其與吸頭之間有高度密合性。
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